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          貝克曼流式細(xì)胞儀熒光微球的調(diào)試及使用

          更新時間:2022-06-15      瀏覽次數(shù):1587
             貝克曼流式細(xì)胞儀熒光微球是一種常用的流量測量儀器,流式細(xì)胞計(jì)是對細(xì)胞進(jìn)行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把一定的細(xì)胞亞群從中分選出來。
            
            流式細(xì)胞儀在使用前,甚至在使用過程中都要精心進(jìn)行調(diào)試,以保證工作的可靠性和最佳性。調(diào)試的項(xiàng)目主要是激光強(qiáng)度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
            1、激光強(qiáng)度:除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外,還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為最大。
            2、液流速度:可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督,調(diào)節(jié)氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
            3、測量區(qū)光路調(diào)節(jié):這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成。
            
            流式細(xì)胞術(shù)中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)或標(biāo)定,這樣才能通過相對測量獲得絕對的意義。因而FCM中的校準(zhǔn)具有雙重功能:儀器的準(zhǔn)直調(diào)整和定量標(biāo)度。標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)該穩(wěn)定,有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經(jīng)濟(jì)、容易獲得。常用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球作為非生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品,雞血紅細(xì)胞做為生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)樣品。微球用樹脂材料制作,或標(biāo)有熒光素,或不標(biāo)記熒光素。

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