貝克曼DNA純化試劑盒是根據(jù)氯化芐法構(gòu)建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細(xì)胞壁的特性。本制品利用了這一特性，將植物樣品凍結(jié)融解后，再使用PipetTip的將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細(xì)胞壁。本法與傳統(tǒng)方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。而且，本制品經(jīng)過(guò)了改良，熱處理時(shí)間只需15分鐘，使用本制品從實(shí)驗(yàn)開始至水相回收只需30分鐘時(shí)間。得到的基因組DNA可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增及限制酶處理等。
全套操作約需1小時(shí)，分勻漿、細(xì)胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟，詳細(xì)說(shuō)明如下。
勻漿和細(xì)胞裂解:
使用不同的實(shí)驗(yàn)材料需采用不同的勻漿步驟，具體說(shuō)明如下：
使用研缽進(jìn)行勻漿時(shí)：
①取1～100mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中，快速用力展研成勻漿。
注）下列組織請(qǐng)加液氮研磨至粉末狀。
A．富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
B．富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
C．富含角質(zhì)蛋白的組織或堅(jiān)硬的組織（如骨骼）等。
?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1，溫和研磨30秒鐘。
注）使用上述①-注）的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，請(qǐng)?jiān)诩尤隨olutionA及RNaseA1后，將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
③收集650μl研磨好的組織勻漿液移至CollectionTube中。如果勻漿體積不足650μl，請(qǐng)補(bǔ)充SolutionA至650μl，65℃保溫5分鐘。
使用研磨棒進(jìn)行勻漿時(shí):
①取1～100mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的CollectionTube中，用研磨棒快速研磨成糊狀。
②加入350μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
?、奂尤?50μl的SolutionA將研磨棒上的勻漿沖入CollectionTube中，充分振蕩混合后，65℃保溫5分鐘。
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更新時(shí)間：2022-01-19 
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